Виды гормона роста и влияние физической нагрузки

Варианты соматотропного гормона и занятия физическими упражнениями

Занятия физическими упражнениями стимулируют секрецию соматотропного гормона (гормона роста, СТГ) передней доли гипофиза, а повышение концентрации СТГ в крови вносит свой вклад в реализацию индуцированной физическими упражнениями гипертрофии мышц и расщепления жиров, а также других физиологических реакций. Анализ литературы, посвященной взаимосвязи секреции СТГ и физических тренировок, позволяет сделать обобщающий вывод о том, что концентрация СТГ в плазме крови в значительной степени определяется продолжительностью и интенсивностью тренировочных занятий.

В то же время гораздо менее очевидным кажется тот факт, что многие способны в полной мере представить себе комплексность процессов, обеспечивающих функционирование системы продукции гормона роста в гипофизе. Связанные с этим вопросы обсуждаются главным образом в статьях, публикуемых в журналах для специалистов, основное внимание которых уделяется секреции СТГ, которая не имеет отношения к занятиям физическими упражнениями. Однако ситуация постепенно начинает изменяться.

Ниже рассмотрим биохимические и физиологические свойства молекулы СТГ и ее разнообразных форм. Проанализируем литературные данные, демонстрирующие изменения соотношения различных вариантов СТГ в крови после занятий физическими упражнениями, также вкратце коснемся некоторых аспектов клеточной биологии гипофиза с надеждой, что эти сведения помогут сформировать фундаментальную основу представлений о том, как продукция различных форм СТГ может быть взаимосвязана с изменениями, происходящими в ответ на занятия аэробными или силовыми упражнениями. И, наконец, представим данные, которые однозначно свидетельствуют о существовании новой цепи обратной связи между мышцами и гипофизом. Авторы уверены, что этот недавно открытый механизм обратной связи поможет объяснить механизм(ы), лежащие в основе индуцированной физическими упражнениями секреции СТГ.

Определение концентрации гормона роста

В настоящее время измерение содержания СТГ в плазме крови практически всегда проводят методом иммуноанализа. В то же время существуют другие системы детекции, но выбор метода определения СТГ в крови по-прежнему не теряет своей важности. До появления метода оценки СТГ с помощью иммуноанализа исследователи обычно полагались на биологические методы определения, для которых, как правило, были необходимы крысы. Некоторые из этих методик применяются в лабораториях, где работают авторы этой главы, и сегодня (Roth et al., 1963; Hunter, Greenwood, 1964). Поскольку использование этих методик часто позволяет получать интересные результаты, которые не всегда согласуются с оценками, полученными методом иммуноанализа, мы считаем оправданным рассмотрение здесь их деталей.

Биологические методы определения СТТ: опыт публикаций прежних лет

Эти тесты, которые были разработаны более 50 лет назад, отражают рост знаний об анаболических, липолитических и диабетогенных эффектах СТГ. Существенные детали некоторых тестов, применявшихся в то время, прекрасно описаны в обзоре 1962 г. (Papkoff, Li, 1962).

В отношении тестов на увеличение массы тела применимы следующие общие требования: для проведения теста необходимо большое количество крыс (10 на один уровень дозы); инъекции могут производиться подкожно или внутрибрюшинно; могут быть использованы нормальные крысы либо с удаленным гипофизом; тесты оценки массы тела отличаются довольно низкой чувствительностью (требуется доза 50 мг в день для взрослых самок и 10 мг в день для незрелых крыс с удаленным гипофизом); показатель точности (рассчитывается путем деления стандартного отклонения на наклон кривой) превышает 0,2; примеси других гормонов (например, тироксина) в препаратах СТГ, полученных из естественных источников, могут оказывать синергичное действие, что приведет к получению завышенных значений оценки. Несмотря на все эти недостатки, традиционный тест на увеличение массы тела, который заключается в измерении прироста массы тела незрелых крыс после подкожного введения СТГ на протяжении 10 дней, в соответствии с законами США остается обязательным для оценки биоидентичности и эффективности препаратов СТГ, получаемых с помощью генно-инженерных технологий.

Что касается тибиатеста или теста определения изменений ширины линии эпифизарного хряща большеберцовой кости крыс под влиянием СТГ (tibial line GH bioassay, Greenspan et al., 1949), основным его преимуществом по сравнению с тестом на увеличение массы тела является заметно более высокая чувствительность (реакция обнаруживается при использовании общей дозы, равной 5 мг, за период 4 суток). В этом тесте производится определение ширины некальцифицированной эпифизарной хрящевой пластинки большеберцовой кости крысы, отделенной от окрашенной нитратом серебра кальцифицированной порции пластинки. Этот тест использовался авторами данной главы при проведении различных исследований, в том числе направленных на изучение эффектов двигательной активности/постельного режима на уровень СТГ в крови.

Список биологических активностей гормона роста человека постоянно расширяется. Как отмечал Страсбургер (Strasburger, 1994), уже достаточно давно известно, что СТГ является анаболическим белком, который стимулирует продольный рост костей. Кроме того, было установлено, что он обладает лактогенным эффектом, агонистическими и антагонистическими свойствами по отношению к инсулину, оказывает липолитическое воздействие, в печени стимулирует орнитиндекарбоксилазу, принимает участие в регуляции натриевого и водного обмена, а также модулирует функцию иммунной системы.

Тесты с использованием культивируемых клеточных линий лимфоцитов IM-9 и адипоцитов ЗТЗ-F422A представляют собой появившиеся относительно недавно, заслуживающие внимания биологические методы определения СТГ in vitro на клетках. По нашим данным, они не применялись для оценки активности СТГ в плазме после занятий физическими упражнениями, поэтому мы не рассматриваем их более детально.

Биологические методы определения СТГ: новые перспективы

В работе, опубликованной Росволлом (Roswall et al., 1996), проведено тщательное сравнение двух новых биологических методов определения СТГ, разработанных в лабораториях авторов, и теста на увеличение массы тела крыс с удаленным гипофизом. Чтобы в полной мере оценить принципы, положенные в основу этих новых методов, необходимо рассмотреть: а) особенности строения молекулы СТГ, полученной генно-инженерным путем (рекомбинантный гормон роста человека, рчСТГ); б) его структурные варианты и продукты деградации; в) молекулярные взаимодействия между этими хорошо изученными формами и рецептором СТГ человека.

Первичная структура рекомбинантного соматотропного гормона человека и ее молекулярные особенности

Первичная последовательность формы рекомбинантного гормона роста человека, состоящая из 191 аминокислотного остатка (22 кДа). Эта форма идентична природной молекуле СТГ с мол. массой 22 кДа, которая синтезируется в гипофизе и выделяется в кровеносное русло при физиологической потребности. Отличительной структурной особенностью является положение остатков цистеина, отвечающих за формирование большой внутренней дисульфидной петли и меньшей по размеру петли на конце с-белка. Показаны также сайты ферментативного расщепления, расположенные между остатками треонина-136 и тирозина-143. Расщепление пептидной молекулы в этом месте приводит к образованию структуры, состоящей из двух цепей, связанных дисульфидными мостиками. Формирование такой двухцепочечной формы может происходить при участии мембран-ассоциированной протеазы во время секреции гормона клетками гипофиза. При длительном хранении СТГ в растворе может происходить дезамидирование остатков аспарагина 149 и 152, а также потеря крайних двух остатков на N-конце.

В биологических образцах обнаруживаются различные структурные варианты СТГ. В своих исследованиях Росволл с коллегами (Roswall et al., 1996) получили два варианта из встречающихся в природе, используя как исходную основу рекомбинантный гормон роста. Один из этих вариантов был димер, образовавшийся в результате формирования ковалентной связи между остатками метионина, другой — транскрипционный вариант с мол. массой 20 кДа, образующийся в результате делеции остатков 32— 46. Эти варианты были использованы в исследованиях, которые рассмотрены ниже.

Знание особенностей взаимодействия молекул рекомбинантного гормона роста с мембранными тканевыми рецепторами СТГ имеет немаловажное значение для более глубокого понимания значения и физиологических последствий повышения уровня СТГ в крови в ответ на занятия физическими упражнениями. Исследования Каннингэма и его коллег позволили более 15 лет назад не только установить полную аминокислотную последовательность мембранного рецептора соматотропина, но и показали, что внеклеточный компонент почти идентичен гликозилированной форме рецептора, выделенного из сыворотки человека (Cunningham, Wells, 1989; Cunningham et al., 1991). Эти исследователи доказали, что одна молекула СТГ с мол. массой 22 кДа образует комплекс с внеклеточными рецепторами двух молекул рецептора СТГ. При низких концентрациях СТГ рецептор связывается с двумя различными участками на поверхности молекулы гормона.

Знание молекулярных основ этого физиологического взаимодействия позволило Росволу (Roswall et al., 1996) разработать два различных типа биологических методов определения СТГ. Один, который носит название высокоэффективная рецепторсвязывающая хроматография (high performance receptor binding chromatography, HPRBC), заключается в сравнении в способности исследуемого образца СТГ и стандартного образца рСТГ формировать стабильный комплекс 2:1 рецептор/СТГ с растворимым рецептором СТГ. Для анализа полученного комплекса использовали эксклюзионную хроматографию в неденатурирующих условиях. Страсбургер с коллегами недавно разработали метод иммуно-функционального иммуноанализа со связанным ферментом (ИФА), который основан на более ранних работах Каннингама и его коллег (Strasburger et al., 1996). В этом методе для оценки функциональной активности препаратов, содержащих гормон роста, используют моноклональные антитела к СТГ и биотинилированный СТГ-связывающий белок. ИФА также применялся для определения содержания соматотропина в системе кровообращения после занятий физическими упражнениями (Nindl et al., 2000).

Второй метод, предложенный Росволлом (Roswall et al., 1996), носит название тест клеточной пролиферации (cell proliferation assay, СР) и состоит в том, что клетки клеточной линии миелоидной лейкемии мыши FDC-P1, трансфецированиые полным геном рецептора, инкубировали с исследуемыми образцами, содержащими СТГ, и оценивали как показатель биологической активности пролиферацию клеток по включению 3Н-меченого тимидина в ДНК. Подобный подход был использован для определения активности различных вариантов СТГ с использованием клеток Ba/F3-hGHR (Wada et al., 1998). В этих клеточных тестах проводится оценка ответной реакции (т. е. синтеза ДНК как показателя пролиферативной активности клеток), которая отделена от процесса димеризации рецептора несколькими звеньями сигнальной цепи. Росволл и его коллеги считают, что благодаря этому мы можем стать “еще на несколько шагов ближе к пониманию биологического ответа in vim» (Roswall et al., 1996, p. 36).

Сравнение результатов различных методов

Сравнение активностей генетических и химических вариантов рекомбинантного соматотропина, определявшихся с использованием теста на увеличение массы тела крыс, высокоэффективной рецепторсвязывающей хроматографии и теста клеточной пролиферации является источником полезной информации, которая может иметь важное значение при проведении последующей оценки аналогичных параметров в плазме крови человека после занятий двигательной активностью. Данные табл. (Roswall et al., 1996) демонстрируют высокую активность и хорошее соответствие между результатами оценки отдельных образцов (например, дезамидированного рСТГ и окисленного рСТГ); низкую активность в случае препаратов димеров или обработанного трипсином рСТГ, а также “сверхактивность” в тесте увеличения массы тела крыс двухцепочечного варианта рСТГ. Как указывают Росволл (Roswall et al., 1996) и другие исследователи, о повышенной биологической активности двухцепочечной формы СТГ сообщалось и ранее.

Несмотря на то что тесты клеточной пролиферации, описанные Росволлом и Вала (Roswall et al., 1996; Wadaet al., 1998), еще только предстоит использовать для изучения образцов крови, отобранных до и после физической нагрузки, кажется весьма вероятным, что уже в ближайшее время они сыграют важную роль в изучении функциональной роли соматотропного гормона.

Разнообразие форм соматотропного гормона, циркулирующих в системе кровообращения

Бауман предположил, что в крови человека можно выявить до 100 различных форм соматотропина (Baumann, 1991b). Концепция, согласно которой многочисленные молекулярные формы гормона роста могут возникать в результате посттрансляционных или трансляционных модификаций продукта экспрессии в гипофизе единственного гена GH-N, очевидно, не нова. Пионерские работы, выполненные в лабораториях Льюиса, Сииха, Костьо, Баумана и других исследователей, послужили основой для последующего анализа, проведенного в статье Баумана (Baumann, 1991b). В табл., заимствованной из этой работы, представлены цифры, характеризующие процентную представленность различных форм СТГ через 15 мин после секреции. Многие исследования, результаты которых обобщает эта таблица, были выполнены до того как рекомбинантные технологии получили широкое распространение. Неудивительно поэтому, что многие из этих данных были получены с помощью традиционных биохимических методов.

В литературе представлено множество экспериментальных данных, которые позволяют охарактеризовать химическую природу различных вариантов СТГ. Короткий, но далеко не полный анализ этих работ очень важен для внутреннего понимания механизмов, обеспечивающих гетерогенность СТГ и образование его комплексов, которые могут принимать участие в ответной реакции организма на физическую нагрузку и адаптации. О том, что иммунореактивный соматотропный гормон плазмы включает несколько видов молекул с различной мол. массой, которые можно разделить эксклюзионной хроматографией, было известно более 30 лет назад. В зависимости от порядка их элюции с колонки в прошлом было удобно выделять три основных изомера (варианта) СТГ: малый, большой и очень большой. Физическая природа этих вариантов гормона роста установлена гораздо хуже по сравнению с исследованиями, в которых был использован рекомбинантный белок. Несмотря на это, детальные исследования двух групп ученых под руководством Баумана и Льюиса (Baumann, 1991а, 1991Ь, 1999; Baumann et al., 1994; Lewis et al., 2000), направленные на характеристику большой и очень большой форм гормона, позволили прийти к заключению, что эти варианты представляют собой серии олигомеров. Наличие таких же олигомеров в экстрактах гипофиза человека также подтверждает эту точку зрения, поэтому большинство ученых считает, что при агрегации может происходить образование, по крайней мере, пентамериых комплексов и различия между большими и очень большими вариантами СТГ достаточно условны. Исследователи предпочитают разбивать олигомеры на группы в зависимости от их молекулярной массы, определенной на основании профиля элюции при хроматографии на сефадексе. Помимо олигомеров СТГ, обнаружены еще заряженные формы гормона, появление которых приписывают ацетилированию, дезамидированию или расщеплению СТГ.

Исследования Столара (Stolar et al., 1984) также показывают, что основная масса большого и очень большого вар
анта СТГ превращается в малую форму СТГ с мол. массой 22 кДа при экстракции и хранении (например, воздействие 4 М тиоционатом калия [KSCN] и два цикла замораживания—оттаивания приводят к превращению 70 % олигомеров в мономер соматотропина). Олигомерные формы гормона, уцелевшие после столь жесткой обработки, мигрируют как отдельные полосы с мол. массой 45, 62, 80 и 110 кДа. Эти формы количественно (почти полностью) превращаются в малую форму гормона после восстановления сульфгидрильных групп. Небольшую часть продукта этой реакции составляет кислая форма СТГ. Вариант СТГ с мол. массой 20 кДа образует главным образом димеры.

Что известно о биологической активности олигомеров фермента? В целом, по результатам тестов с радиорецепторами и на грызунах, считается, что большая форма (димер) имеет пониженную активность. В то же время, по данным иммуиоферментного анализа (Strasburger et al., 1996), димеры при равной молярной концентрации имеют более высокую активность (110 %) по сравнению с мономером, мол. масса которого 22 кДа.

Свойства пяти различных вариантов соматотропина описаны в одном из последних обзоров результатов работы групп Льюиса и Синха (Lewis et al., 2000). Два из них — короткий и длинный пептиды, образующиеся в результате протеолитического расщепления молекулы СТГ между 43-м и 44-м аминокислотными остатками. Данные этих исследователей свидетельствуют в пользу концепции, согласно которой короткий пептид (СТГ[ 1 — 43|) усиливает физиологические эффекты инсулина, а длинный пептид (СТГ|44—1911) обладает антиинсулиновыми свойствами. В действительности они пишут: “Мы считаем, что этот (более крупный) пептид и есть тот самый диабетогенный продукт гипофиза, который так долго не могли найти”.

В экстрактах гипофиза умерших людей и плазме крови был обнаружен пептид с мол. массой около 3 кДа, который проявляет активность в тибиатесте па крысах (Hymer et al., 2000). Этот пептид не является фрагментом СТГ. Связь данного белка с различными формами СТГ, описанными Бауманом, остается неясной (Baumann, 1999). Неполная последовательность этого белка, которая содержит 9—25-й аминокислотные остатки из его средней части, показывает, что он не может быть продуктом расщепления соматотропина. Наиболее интересно, что многие из этих аминокислотных остатков в его составе являются неполярными, а в целом последовательность очень похожа на один из участков молекулы проинсулина. Подобно пептиду С, этот пептид, секретируемый гипофизом, несомненно, также обладает биологической активностью. По неопубликованным данным одной из наших лабораторий (Р.Г.), в экстрактах гипофиза крысы также выявлен небольшой пептид, обнаруживающий положительную реакцию в тибиатесте.

Различные формы соматотропного гормона: возрастающий объем данных

Несмотря на то что уже многие годы известно о стимулирующем воздействии физических упражнений на уровень СТГ в крови, только в последнее время был поставлен вопрос о возможном изменении соотношения различных форм в системе кровообращения под действием физической нагрузки (Nindl et al., 2003). Рассмотрим некоторые предварительные данные, полученные нами в контексте информации, рассмотренной выше. Чтобы проанализировать логическим образом и получить результаты, необходимо учитывать следующие переменные: направленность исследований; тип упражнений (интенсивность/продолжительность); тип определения СТГ; метод, использованный для выделения отдельных форм гормона; специальная обработка образцов крови.

В табл. обобщены результаты разбитых на отдельные группы исследований (в которых участвовали только люди) в соответствии с выбранными нами условиями — в каждом случае образец изучали, хотя бы двумя методами с целью углубления понимания индуцированного упражнениями повышения уровня СТГ в крови, а также оценки количественного соотношения различных форм гормона. Только в одном исследовании (Hymer ct al., 2001) для количественной оценки вариантов СТГ использовали фракционированную плазму, но всех остальных работах изучали только полную плазму.

Экспериментальные данные, накопленные к настоящему времени, свидетельствуют о том, что занятия физическими упражнениями могут изменять активность или молекулярный состав СТГ в крови. Уоллес с коллегами использовали семь различных методов для количественной оценки СТГ у 17 мужчин, занимавшихся аэробной тренировкой, до и после 20 мин велоэргометрии при 80 % V02max, чтобы оценить изменения в содержании различных молекулярных изоформ под воздействием физической нагрузки (Wallace et al., 2001). Сыворотку крови анализировали специфическими антителами к суммарному, гипофизарному, форме 22 кДа, рекомбинатному, не содержащему форму 22 кДа, форме 20 кДа и иммунофункциональному (ИФ) СТГ. Основными результатами этого исследования были выводы о том, что: а) во время и после воздействия физической нафузки происходит повышение содержания в крови всех форм СТГ; б) после прекращения занятия физическими упражнениями преобладающей изоформой был 22 кДа СТГ с мол. массой 73 %; в) соотношение “СТГ, не содержащий формы с 22 кДа” / “суммарный СТГ” и “20 кДа СТГ” / “суммарный СТГ” возрастало, а соотношение “рекомбинантный СТГ» / “гипофизарный СТГ” уменьшалось. Уоллес (Wallace et al., 2001) объяснял увеличение изоформ, отличных от 22 кДа СТГ, более медленным исчезновением 20 кДа и, возможно, других (кроме 22 кДа) форм гормона. В целом результаты, полученные Уоллесом, показывают, что при воздействии интенсивной физической нафузки и в период восстановления происходит изменение соотношения различных изоформ СТГ. Несмотря на то что СТГ с мол. массой 22 кДа был преобладающей молекулярной изоформой, обнаруживаемой в максимальных концентрациях, в период восстановления после воздействия физической нагрузки происходило увеличение других изоформ гормона роста. Это говорит о том, что относительное содержание форм с мол. массой 20 к Да, 17 кДа, а также форм с мол. массой более 22 кДа (димеров, олигомеров и комплексов с серосодержащими белками) после занятий физическими упражнениями возрастает. Авторы предположили, что увеличение доли изоформ с мол. массой, отличающейся от 22 кДа, в период после воздействия физической нагрузки может быть обусловлено дифференциальной секрецией различных изоформ гормона гипофизом, образованием фрагментов, димеров и олигомеров в кровеносной системе, а также различной скоростью клиренса разных форм гормона. Авторы также предположили, что биологический смысл обнаруженных ими явлений может заключаться в повышенном диабетогенном эффекте изоформ СТГ с небольшой молекулярной массой, что может служить механизмом предотвращения гипогликемии в период после физической нагрузки.

Продолжая эксперименты, начатые Уоллесом (Wallace et al., 2001), Химер, Кремер и Ниндл провели исследование, в котором плазму, взятую у 35 женщин до и после интенсивной физической нагрузки (6 подходов приседаний с нафузкой 10 ПМ, с интервалами для отдыха между ними продолжительностью 2 мин), фракционировали с помощью эксюпозионной хроматофафии на фи класса размеров (Hymer et al., 2001). Фракция А содержала молекулы с мол. массой более 60 кДа (предположительно олигомеры и/или мономерный СТГ, связанный с рецептором); фракция В содержала молекулы с мол. массой 30— 60 кДа (предположительно гомо- и гетеродимеры), а в состав фракции С входили молекулы СТГ с мол. массой менее 30 кДа (предположительно смесь изоформ с мол. массой 22, 20, 16, 12 и 5 кДа). После этого все образцы были проанализированы с применением иммуноферментного анализа (Diagnostic Systems Laboratory IFA), радиоиммуномефического анализа (Nichols IRMA) и радиоиммунного анализа (National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases, KIDDKD RIA). Кроме того, был проведен анализ всех образцов до и после обработки глутатионом (GSH) с целью определения эффекта химического восстановления дисульфидных связей. Определение иммунореактивности показало, что для фракции А этот показатель составлял 4 —11 % суммарного СТГ плазмы, для фракции В — 22 —45 % и для фракции С — 44—72 %. Существенное увеличение этого показателя, индуцированное физической нагрузкой, обнаружено для низкомолекулярных форм СТГ (30—60 кДа и менее 30 кДа), но не для высокомолекулярной фракции гормона (более 60 к Да). Другим важным результатом стал тот факт, что химическая редукция образцов, взятых после занятий физическими упражнениями, приводила к увеличению иммунореактивного СТГ, по данным тестов Nichols IRMA и KIDDKD RIA, более значительному, чем это наблюдалось для образцов, взятых до занятия. Это говорит о том, что физическая нагрузка может специфически увеличивать секрецию молекул гормона и/или их фрагментов, связанных дисульфидными мостиками. По данным этого исследования, наиболее значительное влияние интенсивная физическая нагрузка оказывает на димерную форму гормона. Поскольку комплексы СТГ и СТГ-связывающего белка имеют большую продолжительность существования по сравнению со свободным гормоном, вполне вероятно, что димерная форма также обладает большей продолжительностью жизни. Таким образом, суммарный эффект увеличения изоформ СТГ в данном диапазоне молекулярных масс может заключаться в продлении биологической активности этих форм в период после занятий физическими упражнениями.

В работе Ниндла и его соавторов (Nindl et al., 2000) были представлены результаты сопоставления воздействия физической нагрузки на иммунофункциональный (ИФ) СТГ по сравнению с иммунореактивным (ИР) СТГ. Сравнивали концентрацию ИФ и ИР СТГ у мужчин и женщин до и после занятий интенсивными силовыми упражнениями (т. е. 6 подходов приседаний с нагрузкой 10 ПМ и продолжительностью интервалов для отдыха между ними 2 мин). Концентрация ИФ СТГ определялась с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA, Diagmostic Systems Laboratories, Webster, TX, USA), который был разработан на основе результатов Сфасбургера (Strasburger et al., 1996), а концентрация ИР СТГ с помощью РИА с моноклональными антителами (Nichols IRMA, San Juan Capistrano, CA, USA). В этой работе и у женщин, и у мужчин было продемонстрировано сходное увеличение для ИР (мужчины: 1,47 по сравнению с 25,0 нг-мл_|; женщины: 4,0 по сравнению с 25.4 нг-мл-1) и для ИФ (мужчины: 0,55 по сравнению с 11,7 нг-мл-1; женщины: 1,94 по сравнению с 10.4 нг-мл-1) СТГ после занятий физическими упражнениями. В то же время содержание ИФ СТГ было существенно ниже, чем ИР СТГ, и у мужчин, и у женщин. Корреляция между значениями ИФ СТГ и ИР СТГ после физической нагрузки составила г = 0,83. Одним из выводов данного исследования стало то, что примерно половина изоформ СТГ, обнаруживаемых методом радиоиммуноанализа (Nichols IRMA), характеризуется отсутствием свободных мест связывания 1 и 2, необходимых для димеризации рецептора, что может свидетельствовать об отсутствии биологической у этой части изоформ гормона биологической активности.

В следующем эксперименте учитывали, что секреция СТГ происходит не постоянно, а имеет пульсообразный характер. У 10 мужчин определяли содержание ИФ СТГ, отбирая кровь для анализа каждые 10 мин с 17.00 до 6.00. Эксперимент повторяли дважды. Забор крови осуществляли в контрольной группе и у лиц, подвергавшихся интенсивной физической нафузке (Nindl et al., 2001). Физическая иа-фузка состояла в выполнении силовых упражнений со значительным объемом нафузки в период с 15.00 до 17.00. ИФ СТГ определяли методом радиоиммуноанализа и ИФА с поликлональными антителами. Для характеристики пульсообразного характера секреции СТГ использовали систему детекции пиков Pulsar. Несмотря на значительную корреляцию результатов оценки с использованием всех трех методов (коэффициент корреляции составлял от 0,85 до 0,95), метод радиоиммуноанализа снова показал более высокую среднюю концентрацию СТГ по сравнению с ИФ СТГ (3,98 и 1,83 нг-мл”1 соответственно). Значения максимально

Видео по теме

Эндокриная система, спорт и двигательная активность.
Перевод с англ./под ред. У.Дж. Кремера и А.Д. Рогола. — Э64
Издательство: Олимп. литература, 2008 год.